标签抗体概述
日期：2023-07-26 09:23:37
在介绍标签抗体之前，让我们简要介绍一下蛋白标签。蛋白标签（protein tag）是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。通常这些标签可以通过化学试剂或酶的手段切割，以获得无标签的重组蛋白质。标签被附着到蛋白质上有多种目的。
蛋白质标签便于在蛋白工程中的应用，如增加溶解性、易于检测、纯化、定位和表达。蛋白质标签通过抗体帮助识别和纯化感兴趣的蛋白质，它们在免疫印迹、免疫细胞化学、共免疫沉淀、流式细胞术、蛋白质纯化、蛋白质相互作用、细胞超结构和蛋白质等方面有许多用途。
标签抗体是抗原分子的特定区域或群，它决定了抗原的特异性。标签抗体可用于检测标签融合蛋白的表达、细胞内定位和纯化，以及标签融合蛋白的定性或定量检测。融合标签可根据其相对分子质量的大小分为两大类：大型蛋白质分子和小型多肽片段。
CUSABIO的所有标签抗体均为亲和纯化的单克隆抗体，其原理是抗原-抗体反应。这些标签抗体可以高度特异性地结合到相应的标签蛋白上，然后通过特异性的标签抗体识别和纯化它们以进行研究。除了常见的标签（His、Flag、GST和MBP），CUSABIO的标签抗体还具有许多非传统标签，包括V5、GFP、RFP、E2、S和SUMO。这些标签抗体具有高灵敏度、强亲和力、低背景等特点，还可以长时间稳定地储存。根据标签的特性，我们将它们分为三组，
1. 亲和标签
这些标签使您能够从粗细胞裂解液中纯化蛋白质，即使您没有关于其生化性质的任何先前知识。使用特定的亲和树脂可以纯化亲和标记的蛋白质，而商业上可购买的抗体可以方便地用于检测。以下是一些常用的亲和标签：
1.1 His标签
这个标签是一个短肽，由六个组氨酸残基（His-His-His-His-His-His）组成。它专门设计用于亲和纯化重组蛋白质。His标签的相对较小的尺寸使其非常容易整合到表达载体中。此外，由于这些标签不会形成与底物结合的二级结构，即使在变性条件下，您也可以轻松纯化感兴趣的蛋白质。
由于这些特性，His融合标签相比其他标签具有许多优势，是目前用于纯化的最常用的融合标签。可以使用His标签抗体进行His标签融合表达蛋白的检测和表达、细胞内定位和纯化，以及His融合表达蛋白的定性或定量检测等。
CUSABIO的His标签抗体：
应用: ELISA, WB
1.2 谷胱甘肽- s转移酶(GST)标签
GST可用于通过将其编码序列插入感兴趣的蛋白质旁边来纯化蛋白质。经过转录和翻译后，它们将以融合蛋白的形式表达。GST标签系统具有蛋白表达量高、表达产物纯化方便、有利于制备GST抗体等特点。GST融合蛋白可溶于水溶液，可从细菌裂解液中提取，并在不变条件下通过亲和层析获得。融合蛋白又是一种非常好的强免疫原，因此很容易制备针对新蛋白的抗体。
但是GST标签的一个缺点是它是一个30kDa的蛋白质，它的相对较大的尺寸使纯化变得困难。此外，它还增加了扭曲蛋白质自然构象的风险，使它们不适合进行结构研究。为了防止这些事情的发生，可以考虑在纯化后使用特定的蛋白酶从重组蛋白中切割GST基团。近年来，在原核表达系统中，谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用较为普遍。
CUSABIO GST标签抗体：
应用: ELISA, WB
1.3 麦芽糖结合蛋白(MBP)标签
MBP是大肠杆菌中天然存在的一种约42 kDa的蛋白质，由malE基因编码，负责麦芽糊精(一种碳水化合物)的摄取、分解和运输。最初作为蛋白质表达标签在20世纪80年代末被开发，它是最知名和最成熟的标记在微生物中表达的蛋白质的手段之一。此外，已知它能显著提高多种下游融合的靶蛋白的溶解度。
然而，MBP标签提高蛋白质溶解度的确切机制尚不清楚，通常认为它是在蛋白质合成期间和之后稳定和保护其下游乘客蛋白免受蛋白水解降解。mbp融合蛋白的细胞质产量通常也较高，因为融合蛋白为高效翻译起始提供了可靠的环境。
CUSABIO MBP 标签抗体：
应用: ELISA, WB
1.4 钙调蛋白结合蛋白(CBP)标签
CBP亲和标签是一种有用的蛋白质研究标签，可通过DNA重组技术将其添加到目标蛋白质的N或C端。该标签来源于骨骼肌肌球蛋白轻链激酶。该标签由26个氨基酸残基组成，分子量为4 kDa，序列为KRRWKKNFIAVSAANRFKKISSSGAL。CBP相对较小的大小(4 kDa)使其非常适合在温和的条件下快速敏感的捕捉标签融合蛋白。CBP标签对钙调蛋白(CaM)具有较高的亲和力。C标签与钙调蛋白树脂结合，蛋白质可以用含有低浓度钙螯合剂EGTA的中性缓冲液洗脱。CBP Tag抗体是分析CBP标记蛋白的有用工具。
CUSABIO CBP 标签抗体：
应用: ELISA, WB
2. 表位标签
这些标签通常比亲和标签更小，并且能够被抗体迅速识别。由于它们相对较小的尺寸，它们对融合蛋白的结构几乎没有或没有影响。表位标签非常适合多种下游应用，包括免疫印迹（WB）、共免疫沉淀（Co-IP）和免疫荧光实验。以下是一些最受欢迎的表位标签：
2.1 Flag标签
Flag标签是一种常用的短肽标签（DYKDDDDK），可以融合到蛋白的C-端或N-端。该系统用于重组DNA技术，可用于亲和色谱和分离具有多个亚基的蛋白质复合物，也可以与其他亲和标签一起使用。
由于Flag标签与其它同类标签相比更亲水性，因此它们不会使附着的蛋白质变性或失活。因此，现在广泛应用于各种细胞类型，包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等。相应的Flag标签抗体也被广泛使用。Flag标签可以通过添加肠激酶来去除，肠激酶特异性识别肽序列C-端的5个氨基酸残基。Flag抗体可用于检测和表达Flag标记的融合蛋白的表达情况、细胞内定位以及纯化和定性或定量检测Flag融合表达的蛋白。
CUSABIO 标志标签抗体显示：
应用: ELISA, WB, IF, IP
2.2 Myc标签
与Flag标签类似，Myc标签是一种常用的短肽标签（EQKLISEEDL），源自c-myc基因产物，并被许多商业抗体所识别。该标签可以通过重组DNA技术添加到C端或N端，并可用于亲和色谱和分离具有多个亚基的蛋白质复合物。此外，它还可以用于检测细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞中重组蛋白的表达。
这个经过充分验证的Myc标签为检测和纯化带标签目标蛋白提供了可靠的方法，无需特定的抗体或探针。它已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀（IP）和流式细胞术。Myc重组蛋白可以通过将Myc标记的抗体与二乙烯基硫酸酯活化的琼脂糖耦合来亲和纯化，但是Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白的活性，因此Myc标签系统在检测中被广泛应用，但很少用于纯化。
CUSABIO Myc标签抗体显示：
应用: ELISA, WB, IF, IP
2.3 人类流感血凝素（HA）标签
HA（血凝素）标签是源自人类流感病毒HA蛋白的表面糖蛋白的肽序列（YPYDVPDYA）。HA标签系统使用HA短肽与目标蛋白融合，可以位于蛋白质的C端或N端。该系统促进了流感病毒感染宿主的能力，并被许多商业抗体所识别。它已在多种细胞类型中广泛应用，并且相应的HA标记抗体也被广泛使用。HA标记的抗体可以特异性识别带有HA标签的融合蛋白，无论其位于C端还是N端。
CUSABIO的HA标签抗体展示：
应用: ELISA, WB, IF, IP
3. 荧光标签 - GFP标签
荧光标签，也称为荧光标记，是一种化学上附加的分子，用于检测生物分子，如蛋白质、抗体或氨基酸。通常，荧光标记或标签使用荧光分子的反应性衍生物，也称为荧光染料。广泛采用各种标记技术，如酶标记、蛋白标记和遗传标记。乙溴化乙锭、荧光素和绿色荧光蛋白（GFP）是常见的标签。其中，绿色荧光蛋白（GFP）是该类别中最常用的蛋白质标签之一，因为它具有非毒性。基于这一特性，该标签可用于检测活细胞和固定细胞中的标记蛋白。
绿色荧光蛋白，以下简称GFP，最早于1962年从水母Aequorea victoria中分离出来。该蛋白表现出明亮的绿色荧光，在暴露于蓝光或紫外（UV）光下不易褪色。它可以位于蛋白质的C端或N端，并已广泛应用于细菌、酵母和哺乳动物细胞等各种类型的细胞中。相应的GFP标记抗体也被广泛使用。
GFP及其突变体EGFP等广泛用于检测基因表达效率，以及与感兴趣的蛋白质融合表达，用于检测感兴趣蛋白质的表达和分布。通常，GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当的突变体，还可以检测GFP或其适当的突变体融合蛋白的表达、细胞内定位和纯化，以及定性或定量检测GFP融合表达蛋白等。
CUSABIO的GFP标签抗体：
应用: ELISA, WB, IP
4. 其他标签
除了上述的蛋白质标签外，CUSABIO还提供了几种不常见的标签抗体，用于特殊的蛋白质标签，包括Sumo标签、Trx标签、S标签、E2标签、HSV标签等。
CUSABIO的不常见标签抗体：
