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植物外泌体如何提取?

日期:2023-07-12 15:00:09


    植物外泌体的提取是一种用于分离和纯化植物细胞分泌出的外泌体小囊泡的方法。以下是一般的植物外泌体提取步骤:
 
    收集植物细胞培养上清液或植物组织液:从培养的细胞上清液或植物组织液(例如叶片汁液、根系汁液等)中收集外泌体前体物质。可以通过离心或滤液等方法来获得液体样品。
 
    初步离心:将获得的液体样品进行初步离心,以去除大颗粒物质和细胞碎片。常规的离心条件为低速离心(大约300-2000 g)5-10分钟。
 
    超速离心:将初步离心后的上清液进行超速离心,以沉淀植物外泌体。通常选择高速离心条件(约10000-20000 g)30分钟以上,沉淀的外泌体会在离心管底部形成。
 
    洗涤:将外泌体沉淀用适当的缓冲液进行洗涤,以去除杂质和污染物。常用的缓冲液为PBS(磷酸盐缓冲液)或其他适合的洗涤液。
 
    再次超速离心:将洗涤后的外泌体沉淀进行再次超速离心,以去除洗涤液并收集纯化的外泌体。超速离心条件和时间根据不同实验需求可能会有所变化。
 
    分析和应用:最终获得的植物外泌体可以用于后续的分析和应用,例如形态学观察、蛋白质组学研究、RNA或DNA分析等。
 
    植物外泌体的提取方法因样品来源、研究目的和实验要求的不同而有所差异。上述步骤仅为一般指南,具体的提取步骤应根据您的实验要求来进行优化和调整。