tricine胶中夹层胶的作用

日期：2023-06-20 16:23:23

在蛋白质电泳分离中，tricine SDS-PAGE技术是一种常用的方法，其胶体系包括胶上液体、胶下液体和夹层胶。夹层胶是指位于两层SDS胶液层之间的一层特殊胶液，其主要作用是调控样品走形、改善分辨率，提高蛋白质电泳分离的准确度和灵敏度。

夹层胶通常由三种化学物质组成：tricine、bis-tris和柠檬酸。tricine是一种缓冲剂，可保持胶环境的稳定性，使分离的蛋白质能得到有效的缓冲作用；bis-tris是一种弱酸基缓冲剂，在酸性pH下具有良好的缓冲效果，可以维持胶的稳定性；柠檬酸是一种类似EDTA的络合剂，可以与金属离子配对并稳定样品，避免样品降解。

夹层胶的作用主要有以下几点：

1、调整样品走形
使用夹层胶可以协助样品保持在SDS胶液层之间，防止样品产生偏移或“漂移”现象，从而使分离的蛋白质能够更准确、均匀地沉淀在SDS胶液层中。这种方法可使样品与附近的蛋白质分离开来，使电泳分离更加精确。

2、改善分辨率
夹层胶可以缩小样品带的宽度，减少带之间的重叠和混叠，提高分辨率和检测效果。样品与较大的蛋白质分子相结合时，它们可能会难以分离，并且可能需要更长时间来达到完全分离。夹层胶可以增加分离样品的长度，导致更好的分离，同时还可减少较大蛋白质与载体蛋白质之间的交错。

3、提高灵敏度
使用夹层胶可以增强少量样品的分离效果，提高电泳分离的灵敏度。其缓冲剂和络合剂成分可优化样品的条件，从而使分离效果更加优良，进一步加强对低浓度蛋白的检测。

夹层胶在tricine SDS-PAGE技术中具有非常重要的作用，它可以调整样品走形、改善分辨率、提高灵敏度等，这有助于提高蛋白质电泳分离的准确度和灵敏度，为后续的蛋白质分析工作提供了良好的基础。