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抗体纯化的步骤

日期:2023-07-12 14:48:17

    抗体纯化是分离和纯化特定抗体(免疫球蛋白)的过程。以下是常见的抗体纯化步骤:
 
    样品准备:收集包含抗体的生物样品,如血浆、血清或细胞培养上清液。
 
    预处理:将样品进行预处理,去除大颗粒物质和杂质。可以通过离心、过滤或稀释等方法来完成。
 
    亲和层析:利用亲和柱或亲和树脂选择性地捕获目标抗体。这些亲和柱或树脂通常与特定的抗体结合蛋白质或配体相互作用,从而实现抗体的富集。
 
    洗脱:使用合适的洗脱缓冲液,洗脱非特异性吸附的蛋白质和杂质。同时保留目标抗体在柱上。
 
    浓缩和纯化:将洗脱得到的抗体溶液进行浓缩,可以使用浓缩装置或浓缩柱。接着,可以通过透析或其他方法进一步纯化抗体,去除剩余的溶质和杂质。
 
    确认纯度:使用蛋白质分析技术(如SDS-PAGE、Western blot)验证抗体纯度和目标抗原的特异性。
 
    抗体纯化的具体步骤会因应用和实验需求的不同而有所差异。在进行抗体纯化时,还需要遵守相关的实验室操作规范,并采取适当的质量控制措施来确保抗体的质量和纯度。