阳离子填料纯化抗体检测方法?
日期:2023-07-12 13:51:59
阳离子填料是一种常用于蛋白质纯化过程中的材料,可以通过吸附和洗脱的方式来纯化目标蛋白质。下面是一种使用阳离子填料纯化抗体的方法:
样品制备:首先,将含有抗体的样品加入适当的缓冲液中,以维持适宜的pH和离子强度。
填料平衡:将阳离子填料溶悬液加入纯化柱中,并使用缓冲液进行填充剂平衡,以确保填充剂与缓冲液之间的交互作用。
样品加载:将样品溶液缓慢地加入填充剂平衡好的纯化柱中,让抗体与填料表面的正电荷相互作用,并发生吸附。
洗脱:使用适当的洗脱缓冲液,可以通过改变pH、离子强度或洗脱剂浓度等条件,去除非特异性吸附的杂质蛋白质。洗脱后,目标抗体会被彻底洗脱出来。
重生成:为了再次使用填充剂,可以使用一系列的重生成步骤来去除吸附在填充剂表面的残留杂质和去离子缓冲液。
最终纯化:通过收集洗脱液中富集的抗体,可以得到高纯度的抗体。
该方法仅仅是一种常见的纯化步骤之一,具体的纯化方案还需要根据实验需求和样品特性进行优化和调整。
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