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标签抗体与内参抗体的区别是什么?

日期:2023-06-01 15:08:36


    标签抗体和内参抗体都是用于免疫印迹(Western blotting)等蛋白质检测技术中的关键元素。
 
    首先,我们需要了解一下 Western blotting 技术的基本原理。Western blotting 技术是利用特异性抗体结合目标蛋白质,并将其从复杂的混合蛋白质体系中分离出来,然后通过抗体与蛋白质结合反应产生信号,再利用检测系统检测、定量这些信号,来判断待测样品中目标蛋白质的存在和表达水平。


标签抗体

 
    现在来说说标签抗体和内参抗体的区别:
 
1、标签抗体

    标签抗体通常是特异性识别某种特殊标记的抗体,例如 FLAG 标签、HA 标签、Myc 标签等常见的标签。在 Western blotting 实验中,通常会利用这些标签进行蛋白质的表达和检测。例如,当我们在表达待检测蛋白质时,同时将其与 FLAG 标签融合,那么在 Western blotting 实验中,我们就可以用相应的抗 FLAG 标签的抗体进行检测。
 
    标签抗体在 Western blotting 实验中通常作为检测实验的主要抗体,用于检测目标蛋白质的存在与否。由于标签抗体可以专门识别标记,具有极高的特异性和灵敏度,因此在实验中被广泛使用。


内参抗体

 
2、内参抗体

    内参抗体是用于标准化 Western blotting 实验中某些步骤的抗体。Western blotting 实验中,我们往往需要使用内参蛋白来作为比较基准。内参蛋白必须满足在各个样品中表达水平相对稳定,且表达量不受待测蛋白质的影响。在进行 Western blotting 实验时,我们会将待检测蛋白和内参蛋白一起加载到同一个凝胶或膜片上,并通过检测它们的比例来计算待测蛋白的表达量。
 
    内参抗体通常用于检测内参蛋白,而不是作为待检测蛋白的主要抗体。例如,β-actin、GAPDH等常见内参蛋白都有相应的抗体可以使用,这些抗体具有良好的可控性和快速性,可以很好地辅助实验的标准化。
 
    标签抗体和内参抗体主要区别在于在 Western blotting 实验中的使用目的和方式。标签抗体通常作为检测实验的主要抗体,用于检测目标蛋白质的存在与否;而内参抗体则用于标准化实验过程中某些步骤,作为比较基准。