单克隆抗体制备流程图
日期:2023-06-01 15:03:46
单克隆抗体的制备流程是一系列复杂而精细的实验操作,下图是单克隆抗体制备的基本流程图。
抗原准备:制备纯度高、结构完整的抗原,可以是蛋白、多肽、糖或细胞表面分子等。
免疫动物免疫:将抗原和适当剂量的佐剂混合,注射到实验动物体内,激发其免疫系统产生抗原特异性抗体。
细胞融合:收集动物骨髓细胞、脾细胞等,与肿瘤细胞(如骨髓瘤)进行细胞融合,得到一组具有免疫力的杂交瘤细胞。
杂交瘤筛选:采用双倍体选择培养基对细胞进行筛选,保留仅产生单一种类单克隆抗体的杂交瘤细胞。
单克隆抗体生产:将单克隆杂交瘤细胞进行扩增培养,收集上清液和细胞沉淀,分离和纯化抗体。
鉴定和表征:对单克隆抗体进行鉴定和分析,包括抗原特异性、亚型、亲和力等的评估。
应用和开发:将单克隆抗体应用到特定领域的实验或临床诊断中,或进行技术开发和优化,制备不同类型和特性的单克隆抗体。
单克隆抗体制备是一项高度复杂和精细的实验过程,需要在多个操作步骤中进行有效控制,以获得高质量、高效率的单克隆抗体产物。该流程图仅为单克隆抗体制备的基本流程,具体操作步骤根据所使用的免疫动物种类、抗原类型、杂交瘤选择、抗体纯化方法等因素而有所不同。
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