酶联免疫试剂盒组成部分及作用
日期:2023-09-27 13:46:18
酶联免疫试剂盒是常用于检测和定量分析生物样本中特定蛋白质、抗体等分子的方法。它通常由以下几个组成部分构成,并且每个组成部分都有其特定的作用:
酶标记抗体/酶标记物:这是试剂盒中的关键成分,它是一种抗体,将与待检测分子特异性结合的抗体与酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)进行化学结合。酶标记抗体的作用是在试剂盒运行过程中,与待检测分子形成复合物,并提供酶活性用于信号放大。
待检测样本(Sample):这是被测试的生物样本,可能是血清、血浆、尿液、细胞上清液等。待检测样本中含有我们感兴趣的分子(如抗原、抗体),需要通过酶联免疫试剂盒来定量检测其浓度或存在与否。
捕获抗体(Capture Antibody):这是特异性针对待检测分子的抗体,其被固定在试剂盒的微孔板表面。捕获抗体的作用是捕获待检测样本中的目标分子,通过特异性结合来进行分离与富集。
标准品/质控样本(Standard/Control Sample):这是一系列已知浓度的参考物质,用于建立标准曲线和质控样本。标准品的浓度可以覆盖待检测样本中可能存在的范围,通过标准曲线拟合可以计算出待检测样本中目标分子的浓度。
显色底物(Substrate):这是一种显色或荧光底物,它能够与酶反应产生可见或可测量的信号。常见的显色底物有TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)和ABTS(2,2'-氨基二乙基苯并硫酚),荧光底物如发光酶底物等。
停止液(Stop Solution):当底物反应完成后,停止液的加入可以终止酶反应,并防止进一步的信号放大。停止液的添加使读数结果稳定。
通过以上组成部分的配合,酶联免疫试剂盒可以通过酶标记抗体与待检测分子的特异性结合、底物反应与信号生成,来实现对样本中目标分子的定量检测。这使得酶联免疫试剂盒在生命科学研究、临床诊断和药物开发等领域得到广泛应用。
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