酶联免疫吸附法试剂盒原理和作用
日期:2023-07-03 16:12:58
酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是常用的免疫学检测方法,用于检测特定抗原或抗体的存在和浓度。ELISA试剂盒是用于执行ELISA实验的一套化学试剂的组合。
ELISA试剂盒的原理是基于特异性抗原-抗体反应和酶的催化作用。一般来说,ELISA试剂盒包括以下几个步骤:
固定:将待测样品中的目标分子(抗原或抗体)固定在试验板的表面上。通常使用多孔板(如96孔板)作为固相。
捕获:将与目标分子特异性反应的捕获抗体加入到孔中,与固定的目标分子形成抗原-抗体复合物。
检测:加入与目标分子特异性结合的检测抗体,形成二抗夹心复合物。检测抗体上连接有特定的酶(如辣根过氧化物酶,HRP)。
反应:加入底物(如TMB),酶催化底物发生变色反应,产生可检测的信号。酶的活性与目标分子的浓度成正比。
检测:利用吸光度计或荧光计等仪器,测量反应产物的光吸收或荧光强度。根据标准曲线或参考样品的信号值,可以确定待测样品中目标分子的浓度。
ELISA试剂盒的作用是通过特异性的抗原-抗体反应,检测和定量目标分子(抗原或抗体)的存在。ELISA广泛应用于生物医学研究和临床诊断中,例如检测感染性疾病、肿瘤标志物、激素水平等。
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