native page蛋白分子量大于预期

日期：2023-05-09 15:43:30

Native PAGE是用于分离天然的蛋白质复合物或肽段中的寡聚体和单体的一种电泳技术。常见问题是分离出的蛋白分子量大于预期。这可能会由于各种原因造成，下面就分别进行介绍和解决方案：

错误的蛋白分子量估算
首先，需要确认所使用的蛋白分子量标准是否准确。有些厂家提供的Protein Marker不同批次之间可能存在差异，而且市场上存在着很多假冒伪劣的产品。因此，在实验前需要对标准品进行验证，并且在实验中尽量使用新鲜的Protein Marker。

蛋白聚合
蛋白聚合也是导致分子量大于预期的主要因素之一。蛋白聚合是多个蛋白质分子通过非共价或共价键连接在一起形成高分子物质的过程。这个过程是可逆的，可以通过加入尿素、硫代磺酸盐或 β- 硫代乙醇使蛋白质复性并消除聚合。

native page蛋白分子量

缺乏还原剂
native page需要使用无变性剂的缓冲液，因此添加还原剂以减少氧化物的形成对于避免蛋白聚合也是很必要的。

高温处理
有些蛋白质在高温下会失去天然构象并形成聚集，从而产生异常条带。为了避免这种情况的发生，我们需要注意保持实验时的温度，不要将样品暴露在高温环境中。

native page在实验中常见的问题之一是分离出的蛋白分子量大于预期，这可能由多种因素造成。在实验过程中需要注意标准品的验证、蛋白聚合的消除、还原剂的添加和保持适当的温度等操作，以达到更稳定的实验结果。