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离子交换法外泌体纯化的原理

日期:2023-05-24 13:23:27


    外泌体直径约在30-150nm之间。它们由许多细胞类型产生,在生物体内和生物体外发挥着广泛的生物学作用。因此,外泌体的分离和纯化对于深入研究其生物学功能具有重要的意义。目前,离子交换法已经成为一种常用的外泌体纯化方法之一。
 
    离子交换法是通过利用表面带电荷的离子交换树脂与待分离样品中的离子进行相互作用,实现组分的分离的一种手段。在外泌体纯化中,其原理基于外泌体表面的负电荷与阳离子交换树脂之间的相互作用。具体而言,该方法包括样品的预处理、离子交换柱填充、样品加载、洗脱等步骤。
 
    首先,收集培养上清液得到外泌体混合物,以去除非囊泡成分。接着,将混合物经过低速离心去除大颗粒杂质,如细胞碎片和大型蛋白质等。然后,将上述处理后的外泌体混合物加入已装有阳离子交换树脂的柱子中。由于外泌体表面带负电荷,正离子交换树脂会与其表面相互作用,并实现囊泡的特异性结合。
 
    在样品加载完成后,通过调整不同的盐浓度和pH,分别进行快速洗脱和逐级洗脱等步骤,去除与外泌体无关的其他成分。最终,经过重复的样品收集、浓缩、稀释等步骤,即可得到高纯度的外泌体样品。
 
    离子交换法是一种可靠的外泌体纯化方法。通过选择适当的离子交换树脂和优化操作条件,可以实现对外泌体的高效分离和纯化,为外泌体生物学研究提供了有力的工具。