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杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程

日期:2023-09-21 13:14:07


制备单克隆抗体的主要过程是通过杂交瘤技术实现的。以下是其主要步骤:
 
    免疫原注射:将目标抗原注射到小鼠等动物的体内,激活其免疫系统产生特异性抗体。
 
    细胞融合:提取免疫动物的B细胞(产生抗体的细胞)和骨髓瘤细胞(不断分裂的癌细胞),进行细胞融合。
 
    杂交瘤筛选:将融合细胞培养在含有选择性培养基的培养皿中,使只有杂交瘤能够存活,而其他细胞死亡。
 
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    筛选单克隆细胞:通过稀释法将杂交瘤细胞进行分离培养,使每个细胞单独分裂形成单个细胞克隆,最终获得单克隆细胞。
 
    验证单克隆性:对每个单克隆细胞进行酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法验证其产生的抗体特异性和单一性。
 
    扩大培养:将验证为单克隆的细胞进行扩大培养,以大量产生抗体。
 
    纯化抗体:通过柱层析等方法对培养上清液进行纯化,获得单克隆抗体。
 
    制备单克隆抗体的过程中,杂交瘤技术的关键在于融合免疫动物的B细胞和骨髓瘤细胞,从而实现长期稳定地大量产生特异性抗体的单克隆细胞。这种技术的应用广泛,可以用于生物医学研究、药物研发、疾病诊断等领域。