大鼠单克隆抗体的制备原理
日期:2023-09-13 13:36:00
大鼠单克隆抗体的制备主要包括以下步骤:
免疫:将特定抗原注射到小鼠体内,激发其免疫系统产生抗原特异性抗体。
融合:从免疫小鼠体内提取脾细胞和骨髓细胞,与鼠髓瘤细胞(如SP2/0或NS0细胞)进行细胞融合,形成杂交瘤细胞(hybridoma)。
筛选:通过培养基中的选择性物质,筛选出杂交瘤细胞并进行克隆化,得到单克隆细胞株。
培养和收获:将单克隆细胞株培养在培养基中,使其不断增殖。当培养基内的抗体达到一定浓度时,收获培养上清液。
纯化和鉴定:使用亲和层析、离心、超滤等方法对培养上清液进行纯化,获取纯化的单克隆抗体。同时,可以通过免疫电泳、Western blot等技术进行鉴定,确保所得抗体具有特定的抗原结合活性。
整个过程中,关键的一步是杂交瘤细胞的融合,它使得不稳定的抗体产生细胞克隆,保证了后续大量高效的抗体产生。这种制备方法可用于制备高度特异性和高亲和力的单克隆抗体,以满足科学研究、生物药物开发等领域的需求。
上一篇: 抗体糖基化修饰过程
下一篇: 重组抗体和单克隆抗体的区别