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cd31(PECAM-1)抗体制备流程方法和应用

日期:2023-08-16 10:45:04


    CD31(Cluster of Differentiation 31),也被称为PECAM-1(Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1),是细胞表面蛋白,主要表达在内皮细胞中。它在血管内皮细胞间起到细胞粘附和信号传导的重要作用。以下是CD31抗体的制备流程方法和应用:
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CD31抗体制备流程方法:
 
​    免疫原选择:免疫原可以选择纯化的CD31蛋白或者含有CD31的细胞膜提取物。
 
免疫动物选择:常用的免疫动物包括小鼠、兔子等。根据实验需要选择适合的免疫动物。
 
​    免疫原注射:将选择的免疫原与佐剂混合后注射到免疫动物体内。通常需要进行多次免疫来增强免疫效果。
 
​    获得免疫细胞:在注射一定次数后,从免疫动物体内获取免疫细胞,如脾细胞或骨髓细胞。
 
​    融合细胞:将免疫细胞与肿瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞。
 
​    筛选和克隆:通过培养基中添加选择抗生素等方法筛选并进行克隆,以获得单克隆的CD31抗体产生的杂交瘤细胞。
 
​    抗体纯化:采用亲和层析、凝胶过滤等技术对CD31抗体进行纯化。
 
PECAM-1抗体的应用:
 
​    IHC免疫组化(Immunohistochemistry):CD31抗体可以用于检测和定位血管内皮细胞,在组织切片中显示血管分布情况。
 
​    ICC免疫细胞化学荧光染色(Immunocytochemistry):CD31抗体可以用于检测和鉴定内皮细胞及其衍生细胞。
 
​    WB免疫印迹(Western Blotting):CD31抗体可以用于检测CD31蛋白在细胞或组织中的表达水平。
 
​    FC流式细胞术(Flow Cytometry):CD31抗体可以用于检测血液中单个细胞表面的CD31蛋白,用于血管内皮细胞的鉴定和分类。
 
    总的来说,CD31抗体的制备和应用有助于研究血管内皮细胞的功能和相关疾病,如血管发育、血管生成、心血管疾病等。