单克隆抗体第二次筛选的方法
日期:2023-08-02 17:09:13
单克隆抗体第二次筛选的方法可以使用以下几种常见的技术:
酶联免疫吸附试验(ELISA):将第一次筛选得到的候选单克隆抗体与目标抗原结合,然后通过酶标记的二抗检测是否有特异性结合。这种方法可以初步评估单克隆抗体的亲和力和特异性。
FC流式细胞术(Flow cytometry):适用于细胞表面标志物的单克隆抗体筛选。将候选单克隆抗体与目标细胞混合,通过流式细胞仪检测是否有特异性结合。这种方法可以快速筛选出特异性较强的单克隆抗体。
生物素-链霉亲和素系统(Biotin-streptavidin system):利用生物素与链霉亲和素的高亲和力进行筛选。将候选单克隆抗体与生物素标记的目标抗原结合,然后与链霉亲和素结合的亲和柱进行结合,最后从中洗脱特异结合的单克隆抗体。
免疫组化筛选:将候选单克隆抗体与目标组织或细胞切片反应,使用特定的染色方法检测是否有特异性结合。这种方法适用于筛选对传统抗原无特异结合但在组织或细胞中具有特异结合能力的单克隆抗体。
以上方法只是常见的单克隆抗体第二次筛选方法之一,具体选择哪种方法还需要根据实际情况和研究目的来确定。另外,不同实验室和研究者可能还会使用其他筛选方法进行单克隆抗体的进一步鉴定和优化。
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