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鼠抗鸡IgY单克隆抗体制备技术

日期:2023-07-25 16:37:18


    鼠抗鸡IgY单克隆抗体制备技术是一种通过鼠源性B细胞与鸡IgY抗原进行免疫和融合的技术流程,用于获得针对鸡IgY的高特异性和高亲和力的单克隆抗体。以下是一般的鼠抗鸡IgY单克隆抗体制备技术步骤:
 
    抗原制备:从鸡的血清或蛋黄中提取IgY抗原,可以通过凝集素沉淀、离心等方法纯化IgY。
 
    免疫原选择:选择适当的免疫佐剂和免疫计划,将鸡IgY抗原注射到小鼠体内,激发小鼠产生免疫应答。
 
    融合细胞制备:在免疫结束后,收集小鼠脾脏等淋巴组织,制备单细胞悬浮液。
 
    随机杂交:将小鼠B细胞与鼠髓瘤细胞(如SP2/0或NS-1)进行融合,形成杂交瘤细胞。
 
    杂交瘤筛选:在培养基中筛选出产生针对鸡IgY的单克隆抗体的杂交瘤细胞。
 
    单克隆抗体扩增:将成功筛选出的单克隆细胞株进行扩增培养。
 
    单克隆抗体纯化:通过离心、过滤和亲和层析等技术,从培养上清中纯化出单克隆抗体。
 
    验证和鉴定:对纯化得到的单克隆抗体进行特异性和亲和力的验证和鉴定。
 
    每个实验室可能有不同的优化步骤和具体操作细节,请在实施前参考相关文献或咨询专业人士。