wb抗体种属怎么选择?
日期:2023-07-04 16:18:18
在进行Western blotting(免疫印迹)实验时,选择适当的抗体种属是非常重要的,以避免由于物种特异性而导致的交叉反应或杂交信号。
以下是选择抗体种属的一些建议:
目标蛋白的种属:首先确定您要检测的目标蛋白所属的物种。如果您的样品来自人类,那么选择来自其他物种的抗体,如小鼠、兔子或羊等,可能会更好,因为这些抗体通常对人类蛋白有较高的特异性。
一级抗体种属:选择与您样品来源不同种属的一级抗体。例如,如果您的样品来自人类,那么您可以选择小鼠或兔子的抗体作为一级抗体。这种不同种属的抗体可以识别并结合到目标蛋白上。
二级抗体种属:选择与一级抗体相应种属的二级抗体。二级抗体是与一级抗体结合的抗体,其可被用于探测和检测一级抗体。通常情况下,二级抗体是标记有较容易检测的荧光染料或酶的抗体。
物种交叉反应:在选择抗体时要注意潜在的物种交叉反应。一些抗体可能对多个物种的蛋白具有较高的交叉反应性,这可能会导致误解或干扰。确保验证抗体的特异性,并查阅相关文献以了解抗体在特定物种中的应用情况。
每个实验都是独特的,对于不同的目标蛋白和实验条件,可能需要进行不同的选择和优化。因此,在选择抗体种属时,请参考相关文献、抗体供应商的指南,并根据自己的实验需求进行验证和优化。