双特异性抗体的制备方法

日期：2023-05-31 13:28:35

双特异性抗体（bispecific antibodies, BsAbs）是近年来快速发展的一种新型生物药物，具有两个不同的抗原结合位点，能够同时与两种特异性抗原结合，从而实现多种治疗方式的应用。该类抗体的制备方法多种多样，常见的制备方法包括杂交免疫球蛋白（heterodimeric Fabs）、双链变量区抗体（variable domains of heavy and light chains，VHH-VL）和微型抗体（diabodies）等。

一、杂交免疫球蛋白制备方法

杂交免疫球蛋白（heterodimeric Fabs）可由两个单一特异性抗体的 Fab 片段组成。该方法的制备流程如下：

1、分别构建两个不同的单一特异性抗体。
2、将两个抗体的 Fab 片段分别剪切下来。
3、通过交联反应，将两个 Fab 片段结合起来形成杂交免疫球蛋白。

二、双链变量区抗体制备方法

双链变量区抗体（VHH-VL）是基于自然的骆驼、鲸鱼等动物体内生成的单域抗体进行改造得到的，其特点是只包含一个完整的抗原结合位点，但具有高度的亲和力和稳定性。该方法的制备流程如下：

1、通过免疫技术或基因工程技术制备单域抗体（VHH）。
2、使用链重组技术，将两个 VHH 片段结合起来，形成双链变量区抗体。

特异性抗体

三、微型抗体制备方法

微型抗体（diabodies）是由两个不同特异性抗体的重链变量区和轻链变量区相互连接而成的分子，它可以以二聚体的形式，同时与两种抗原结合。该方法的制备流程如下：

1、利用基因工程技术从两个单一特异性抗体中分离出重链和轻链变量区。
2、将两个变量区连接起来，形成蛋白质分子。
3、通过经验确定合适的二聚体构型，并进行优化。

以上是双特异性抗体的主要制备方法，各种制备方法都有其优缺点，选择恰当的制备方法需要根据具体应用情况和目标去选择。