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抗体提纯溶液配制方法

日期:2023-03-15 09:45:51

    抗体提纯液的配制通常取决于具体的实验设计和要求,以下是一般的抗体提纯液的组成及配制方法:
    磷酸盐缓冲液(PBS):用于洗涤和稀释,配制方法为:将10×PBS缓冲液用纯水稀释至1×PBS浓度,ph调整至7.4左右。
    细胞破碎液:用于细胞破碎和抗体的初步纯化。细胞破碎液的组成可以包括不同浓度的盐、缓冲剂、蛋白酶抑制剂和界面活性剂等。
     常用的细胞破碎液配方包括:
    RIPA缓冲液:50mm Tris-Hcl(pH 7.4)、150mm Nacl、1% NP-40、0.5% sodium deoxycholate、0.1% SDS。
    NP-40缓冲液:50mm Tris-Hcl(pH 8.0)、150mm Nacl、1% NP-40、1mm EDTA。
    Triton X-100缓冲液:50mm Tris-HCl(pH 7.5)、150mm Nacl、1% Triton X-100、0.5% sodium deoxycholate、0.1% SDS。

    层析缓冲液:用于抗体的柱层析。层析缓冲液的组成取决于柱层析的类型和具体的分离条件。
    常用的层析缓冲液包括:
    离子交换层析缓冲液:20mm Tris-Hcl(pH 8.0)、50mm Nacl、5mm imidazole。
    亲和层析缓冲液:20mm Tris-Hcl(pH 8.0)、500mm Nacl、5mm imidazole、10mm β-mercaptoethanol。
    凝胶过滤层析缓冲液:20mm Tris-Hcl(pH 7.5)、150mm Nacl、5mm imidazole、10%甘油。

    洗脱缓冲液:用于从柱层析中洗脱抗体。洗脱缓冲液的组成取决于柱层析的类型和具体的分离条件。
    常用的洗脱缓冲液包括:
    离子交换层析洗脱缓冲液:20mm Tris-Hcl(pH 8.0)、1M Nacl、5mm imidazole。