生物素蛋白
1. 什么是生物素化蛋白质?
生物素化蛋白质是一类蛋白质,其中氨基酸或糖基部分通过化学或酶法与生物素分子共价结合。
2. 为什么蛋白质需要进行生物素化?
生物素在分子生物学和生物技术中广泛用作蛋白质或抗体的结合物。它是由植物和许多原核生物产生的小型水溶性分子。生物素和链霉亲和素或鸟苷酸的结合是已知非共价生物相互作用中最强的之一。重组或纯化蛋白质的生物素化将生物素的生化特性引入目标蛋白质中,而不干扰原始蛋白质本身的特性。除了生物素与链霉亲和素结合的亲和性强外,其相对较小的大小和易于衍生化的戊二酰侧链使其非常适合标记蛋白质。
3. 蛋白质如何生物素化?
蛋白质可以通过酶法或化学法进行生物素化。蛋白质的化学生物素化可以在体外用化学试剂实现,这使得生物素可以与蛋白质上的任何反应性功能基团共价耦合。然而,化学生物素化缺乏重复性,并且因蛋白质之间反应性功能基团的可用性而有所不同。添加的生物素数量不一致,并且生物素与目标蛋白质的结合是不可控的。而且,某些赖氨酸残基的修饰可能导致结合位点失活。
j9九游会登录入口首页生物的生物素化蛋白质是通过酶法制备的。Avi-tag是一个由15个氨基酸组成的小肽序列,融合在感兴趣的蛋白质的N端或C端。在融合表达后,带有Avitag的蛋白质可以在体内或体外通过生物素蛋白连接酶(BPL)与赖氨酸残基结合,从而实现蛋白质的生物素化。基于Avitag技术的蛋白质生物素化确保生物素仅发生在Avitag的赖氨酸残基上,并且不影响目标蛋白质的自然结合活性。
4. 生物素化蛋白质有什么用途?
任何生物素化蛋白质都可以与蛋白质结合的卵清蛋白亲和素和真菌蛋白链霉亲和素紧密结合。用生物素标记重组或纯化的蛋白质可用于蛋白质的捕获、纯化、固定和功能化,以及多聚化或桥联分子。生物素化蛋白质可以通过链霉亲和素包被的柱或珠子进行简单纯化。
生物素化蛋白质常常与链霉亲和素结合物一起在许多蛋白质研究应用中进行检测或纯化,包括酶联免疫吸附测定(ELISA)、蛋白质印迹(Western blot)分析、免疫组化(IHC)、免疫共沉淀(IP)以及其他亲和纯化、细胞表面标记和流式细胞仪/荧光激活细胞分选(FACS)等方法。
j9九游会登录入口首页生物的生物素化蛋白质已经进行了预标记和实验验证。它们的活性高,纯度高,批间变异性低,并且具有优异的检测灵敏度。以下是一些生物素化蛋白质的列表:
Recombinant Human CD44, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP004938HU(F1)j1-B)
(tris -甘氨酸凝胶)不连续SDS-PAGE(还原),5%富集凝胶和15%分离凝胶。
通过酶联免疫吸附测定其结合能力。2 μg/ml的固定抗CD44小鼠单克隆抗体(CSB-MA004938A0m)能与生物素化的人CD44结合,EC50为2.865 ~ 5.099 ng/ml。
Recombinant HumanTNFSF14, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP023991HUj7-B)
(tris -甘氨酸凝胶)不连续SDS-PAGE(还原),5%富集凝胶和15%分离凝胶。
通过酶联免疫吸附测定其结合能力。固定的人TNFRSF14(CSB-MP842173HU)在5 μg/ml时能与生物素化的人TNFRSF14结合,EC50为1.773 ~ 3.707 ng/ml。
Recombinant Human GHR, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP009411HUj1-B)
(tris -甘氨酸凝胶)不连续SDS-PAGE(还原),5%富集凝胶和15%分离凝胶。
通过酶联免疫吸附测定其结合能力。10 μg/ml的固定化KLRK1(CSB-MP012474HU1)能与人生物素化ULBP1结合,EC50为4.254 ~ 7.295 ng/ml。
Recombinant Human GHR, partial, Biotinylated (Active) (CSB-MP009411HUj1-B)
(tris -甘氨酸凝胶)不连续SDS-PAGE(还原),5%富集凝胶和15%分离凝胶。
通过酶联免疫吸附测定其结合能力。10 μg/ml的固定化KLRK1(CSB-MP012474HU1)能与人生物素化ULBP1结合,EC50为4.254 ~ 7.295 ng/ml。
Recombinant Human TNFSF13B, partial (Active) (CSB-MP897523HU1-B)
(tris -甘氨酸凝胶)不连续SDS-PAGE(还原),5%富集凝胶和15%分离凝胶。
通过酶联免疫吸附测定其结合能力。10 μg/ml的固定化人BCMA(CSB-MP023974HU1)能与人生物素化TNFSF13B结合,EC50为0.1752-0.3657 ng/ml。
所有生物素化蛋白
基因名称 | 货号 | 产品名称 | 来源 | 标签 |
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ACE2 | CSB-MP866317HU-B | Recombinant Human Angiotensin-converting enzyme 2(ACE2),partial,Biotinylated (Active) | 哺乳动物细胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
CD44 | CSB-MP004938HU(F1)j1-B | Recombinant Human CD44 antigen(CD44), partial, Biotinylated | 哺乳动物细胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
TNFSF14 | CSB-MP023991HUj7-B | Recombinant Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 14(TNFSF14), partial, Biotinylated | 哺乳动物细胞 | N-terminal hFc-Avi-tagged |
GHR | CSB-MP009411HUj1-B | Recombinant Human Growth hormone receptor(GHR), partial, Biotinylated | 哺乳动物细胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
ULBP1 | CSB-MP887177HUj1-B | Recombinant Human UL16-binding protein 1(ULBP1), Biotinylated | 哺乳动物细胞 | C-terminal mFc-Avi-tagged |
TNFSF13B | CSB-MP897523HU1-B | Recombinant Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B(TNFSF13B), partial, Biotinylated | 哺乳动物细胞 | N-terminal hFc-Avi-tagged |